（ 1 莱阳农学院动物科技学院 山东 青岛 266109 ； 2 山东信得药业有限公司 山东 青岛 266061 ）
摘要： 本试验选取 21 日龄的健康仔猪 12 头随机分为 3 组，三组分别肌肉注射 猪瘟兔化弱毒 疫苗 1 头剂（对照组）、 猪瘟兔化弱毒 疫苗 1 头剂 +1ml 猪脾转移因子（试验一组）和 猪瘟兔化弱毒 疫苗 1 头剂 +2ml 猪脾转移因子（试验二组）分别于 21 、 60 天进行第一、二次免疫以研究猪脾转移因子对仔猪 猪瘟兔化弱毒 疫苗免疫效果的影响。结果表明：免疫后 14 ～ 35 天试验组的免疫效果均优于对照 组（ p<0.05 ） ，二免后 5 ～ 15 天试验二组优于对照组 （ p<0.05 ）。 另外，选取 35 日龄的健康仔猪 12 头随机分为 3 组，三组分别肌肉注射 猪蓝耳病弱毒 疫苗 1 头剂（对照组）、 猪蓝耳病弱毒 疫苗 1 头剂 +1ml 猪脾转移因子（试验一组）和 猪蓝耳病弱毒 疫苗 1 头剂 +2ml 猪脾转移因子（试验二组）于 35 天进行免疫以研究猪脾转移因子对仔猪 猪蓝耳病弱毒 疫苗免疫效果的影响。结果表明：免疫后 14 ～ 35 天试验组的免疫效果均优于对照 组（ p<0.05 ） ， 42 ～ 60 天试验二组优于对照组 （ p<0.05 ）。 总之，猪脾转移因子对仔猪体液免疫有一定的作用效果。
关键词： 猪脾转移因子； 仔猪；免疫
转移因子 (Transfer Factor ， TF) 是 T 淋巴细胞释放的一种能够转移致敏信息的可透析小分子物质，它能够特异的将供体的细胞免疫信息转移给受体，从而增强受体的免疫功能 [1] 。 TF 含多种成分，分子量小，无热原，无抗原性，无毒副作用和无种属差异，是一种新型而又安全的免疫制剂 [2] 。
猪瘟 (Classical Swine Fever, CSF) 是由猪瘟病毒 (CSFV) 引起的一种猪的急性、烈性传染病，世界动物卫生组织 (OIE) 将此病列为 A 类传染病；猪繁殖与呼吸综合征 (porcine reproductive respiratory and syndrome, PRRS) 是由 PRRSV 引起的，以繁殖障碍、呼吸道症状为特点的，具有高度传染性的病毒病。 CSF 和 PRRS 对世界养猪业已构成严重威胁。
本文系统报道猪脾转移因子对免疫仔猪猪瘟疫苗和猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫效果的影响。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 试验动物 21 日龄 12 头仔猪，由山东省龙大集团种猪场提供。
1.1.2 猪脾转移因子注射液 由山东信得药业有限公司提供，批号 099042 。
1.1.3 疫苗 猪瘟兔化弱毒 疫苗 （批号为）、 猪蓝耳病弱毒 疫苗 （批号为） ，均由中牧股份生产。
1.1.4 其他 猪瘟诊 断 ELISA 试剂盒购自中国农业科学院兰州兽医研究所；猪呼吸与繁殖综合征诊断 ELISA 试剂盒购自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。
1.2 方法
1.2.1 试验猪的免疫
在 21 日龄将仔猪随机分成 3 组进行免疫试验，试验设计方案见表 1 。
______________________
作者简介： 张伟 (1979-) ，男，山东莱芜人，硕士研究生，主要从事动物营养代谢病与中毒病研究。 * 通讯作者
表 1 试验猪的猪瘟 兔化弱毒 疫苗免疫设计
组别 |
用药剂量 |
接种方法 |
动物数量 / 头 |
对照组 |
猪瘟兔化弱毒 疫苗 1 头剂 |
肌肉注射 |
4 |
试验一组 |
猪瘟兔化弱毒 疫苗 1 头剂 +1ml 猪脾转移因子 |
肌肉注射 |
4 |
试验二组 |
猪瘟兔化弱毒 疫苗 1 头剂 +2ml 猪脾转移因子 |
肌肉注射 |
4 |
在 35 日龄将仔猪随机分成 3 组进行免疫试验 , 试验设计方案见表 2 。
表 2 试验猪的 猪蓝耳病弱毒 疫苗免疫设计
组别 |
用药剂量 |
接种方法 |
动物数量 / 头 |
对照组 |
猪蓝耳病弱毒 疫苗 1 头剂 |
肌肉注射 |
4 |
试验一组 |
猪蓝耳病弱毒 疫苗 1 头剂 +1ml 猪脾转移因子 |
肌肉注射 |
4 |
试验二组 |
猪蓝耳病弱毒 疫苗 1 头剂 +2ml 猪脾转移因子 |
肌肉注射 |
4 |
1.2.2 抗体水平的测定 分别在免疫疫苗前和免疫后第 7 天、 14 、 21 、 35 、 42 、 60 天采血分离血清，猪瘟 兔化弱毒 疫苗抗体水平的测定是由兰州兽医研究所提供的猪瘟诊断 ELISA 试剂盒进行测定； 猪蓝耳病弱毒 疫苗抗体水平的测定是由哈尔滨兽医研究所提供的 PRRS 诊断 ELISA 试剂盒进行测定。
1.3 统计分析
各数据均采用 SPSS12.0 软件进行统计分析。
2 结果
2.1 猪脾转移因子对猪瘟兔化弱毒疫苗疫苗免疫效果的影响
首免后 14 ～ 35d 试验一和二组组间抗体滴度差异不显著，均明显高于对照组；二免后 5~15 天试验二组与对照组、试验一组抗体滴度差异显著，试验一组与对照组差异不显著（见表 3 ）。
表 3 猪脾转移因子对猪瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的影响（ log 2 ） n=4
组别 |
用药剂量（ ml） |
用药前 |
第一次免疫后 |
第二次免疫后 |
7天 |
14天 |
21天 |
28天 |
35天 |
5天 |
15天 |
30天 |
对照组 |
0 |
3.32±0.00 a |
4.57±0.25 a |
5.32±0.00 b |
5.07±0.25 b |
4.82±0.29 b |
3.57±0.25 b |
5.07±0.25 b |
4.57±0.25 b |
3.82±0.29 a |
试验一组 |
1 |
3.57±0.25 a |
5.07±0.48 a |
6.57±0.25 a |
6.82±0.29 a |
6.07±0.48 a |
4.82±0.29 a |
5.57±0.25 ab |
5.07±0.25 ab |
4.32±0.41 a |
试验二组 |
2 |
3.32±0.00 a |
4.82±0.29 a |
6.82±0.29 a |
7.07±0.25 a |
6.32±0.00 a |
5.07±0.25 a |
6.32±0.41 a |
5.57±0.25 a |
4.82±0.28 a |
注：字母上标相同的为差异不显著（ p>0.05 ），字母上标不同的为差异显著（ p<0.05 ）。
2.2 猪脾转移因子对 猪蓝耳病弱毒 疫苗免疫效果的影响
免疫后 14~35 天试验一和二组组间抗体滴度差异不显著，均明显高于对照组； 42~60 天试验二组与对照组、试验一组抗体滴度差异显著，试验一组与对照组差异不显著（见表 4 ）。
表二 猪脾转移因子对 猪蓝耳病弱毒 疫苗免疫效果的影响（ log 2 ） n=4
组别 |
用药剂量（ ml） |
用药前 |
免疫后 |
7天 |
14天 |
21天 |
28天 |
35天 |
42天 |
60天 |
对照组 |
0 |
4.64 ± 0.00 a |
4.64 ± 0.00 a |
5.14 ± 0 .28 b |
5.89 ± 0.25 b |
6.39 ± 0.25 b |
6.14 ± 0.29 b |
5.39 ± 0.25 b |
5.14 ± 0.29 b |
试验一组 |
1 |
4.64 ± 0.00 a |
4.64 ± 0.00 a |
5.89 ± 0.25 a |
7.14 ± 0.29 a |
7.39 ± 0.25 a |
7.14 ± 0.29 a |
6.14 ± 0.29 ab |
5.64 ± 0.00 ab |
试验二组 |
2 |
4.64 ± 0.00 a |
4.64 ± 0.00 a |
6.64 ± 0. 41 a |
7.39 ± 0.25 a |
7.89 ± 0.25 a |
7.39 ± 0.29 a |
6.89 ± 0.25 a |
6.14 ± 0.29 a |
注：字母上标相同的为差异不显著（ p>0.05 ），字母上标不同的为差异显著（ p<0.05 ）。
3 讨论
近年来对鸡脾转移因子的研究比较多。 邵兵等报道， 鸡脾转移因子（ TF ）对新城疫活疫苗有免疫增强作用，而在母源抗体水平较高时，免疫增强作用不明显； TF 对法氏囊活疫苗未显示明显的免疫增强作用 [3] 。 李相安等报道， TF 可显著提高雏鸡外周血液 ANAE + T 淋巴细胞百分率；免疫器官脾和法氏囊的相对湿重增加明显 [4] 。另外研究表明 [5] ， 注射 TF 能提高粤黄鸡外周血 T 淋巴细胞百分率，并提高鸡血清中 ND 的抗体滴度。但对猪脾转移因子的研究较少。本 试验结果表明：猪脾转移因子能够增强猪体液免疫效果。在首次免疫猪瘟兔化弱毒疫苗后第 14 天可以从血清中检测出较高的抗体水平；在免疫猪瘟兔化弱毒疫苗同时肌肉注射猪脾转移因子是抗体水平在首次免疫后 21 天达到高峰，这与 陈西钊 等报道基本吻合 [6] ；在二次免疫后 5~15 天试验二组与对照组差异显著，说明猪脾转移因子免疫增强作用时间较长。在免疫 猪蓝耳病弱毒 疫苗 后第 14 天可以从血清中检测出较高的抗体水平，在 28 天达到高峰，这 与何信群等 报道 基本 吻合 [7] ；在免疫 猪蓝耳病弱毒 疫苗 同时肌肉注射猪脾转移因子后 14~60 天试验二组和对照组差异显著。
猪脾转移因子对其它疫苗的免疫效果的影响还有待于进一步的研究。
参考文献：
[1] 李富桂 , 张文生 . 鸡转移因子的制备及其应用研究Ⅰ—制备及其理化、生物特性检测 [J]. 中国预防兽医学报 ,1994(5):53-55.
[2] fudenberg H. in Research and Application of Transfer Factor and DLE, Edited by Huo Bao-Lai.1998:551-559.
[3] 邵兵 , 艾武 , 王春玲 , 等 . 鸡脾转移因子对鸡新城疫、传染性法氏囊病活疫苗免疫效果的影响 [J]. 山东家禽 ,2002,12:14~15.
[4] 李相安 , 杨林 . 鸡脾转移因子对雏鸡免疫功能的影响 [J]. 山东家禽 ,2001,1:9~10.
[5] 江青艳 , 戴远威 , 傅伟龙 , 等 . 脾脏转移因子对粤黄鸡免疫机能的影响 [J]. 畜牧兽医杂志 , 1996,15(3):6~8.
[6] 陈西钊 , 叶春艳 , 蒋进等 . 猪瘟抗体监测及免疫效果分析 [J]. 中国农业科学 ,2002,35(4):457~459.
[7] 何信群 , 闫福栋 , 申咏红 , 等 . 猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒株活疫苗抗体应答水平的观察 [J]. 中国兽药杂志 2003,37(11):24~26.
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